蝙蝠在夜間飛行不是靠眼睛看的，而是靠耳朵和發音器官飛行的。
蝙蝠在飛行時，會發出壹種尖叫聲，這是壹種超聲波信號，是人類無法聽到的，因為它的音頻很高。這些超聲波的信號若在飛行路線上碰到其他物體，就會立刻反射回來，在接收到返回的信息之後，蝙蝠於振翅之間就完成了聽、看、計算與繞開障礙物的全部過程。
科學家把這種現象叫作回聲定位。人類根據蝙蝠飛行識物的原理，制造出了雷達。但蝙蝠身上“儀器”的精確度比雷達要高得多。
頭骨與牙齒
蝙蝠的頭骨和牙齒的形狀主要和所吃的食物有關。雜食的葉口蝠和食蟲的圓耳蝠（四耳蝠屬）有最普通的牙齒以便嚼碎食物，而大食果蝠有大而平的臼齒。吸食花蜜的無尾長舌蝠很少使用牙齒，然而它們的頭骨被拉長以容下壹條長而多毛的舌頭。
普通吸血蝠鑿子壹樣的門齒和豎向扁平像剃刀壹樣的上犬齒被用來在動物皮膚上咬開壹個槽形切口，以便於它在裏面舔食血液。肉食的假吸血蝠有巨大的頭骨，強壯尖銳的犬齒和剪刀壹樣的日齒，可以削骨切肉。