殺毒軟件在查找到可能被感染了病毒的文件時，如果該文件是系統或某個程序所需要的重要文件，而又不確定該檔是否真的感染了病毒，害怕刪除該文件後會對系統或程序造成損壞時，就可以選擇將它隔離。ESET NOD32會將該檔隔離到壹個安全的檔夾中進行保存，存儲到該檔夾中的檔是無法被執行的，從而保證該文件不會繼續危害到系統的安全。等妳能夠確定該檔的安全性後，就可以在隔離區中選擇刪除該檔或是還原後重新使用。
在隔離文件右鍵選擇清除，隔離的文件連病毒就會壹起被刪除掉。
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