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pcr的三個步驟

pcr的三個步驟如下:

1.變性:雙鏈DNA在高溫條件下(90~95℃)變成兩條單鏈,作為DNA復制的模板;

2.退火:單鏈DNA在較低溫度 F(37?60°C) 與引物互補結合,形成雜交雙鏈結構;

3.延伸:升溫至70~75℃,結合模板上的引物在耐熱DNA聚合酶的催化下按 5'→3' 方向延伸,合成模板DNA的互不鏈。

PCR的介紹:

聚合酶鏈式反應(PCR)是壹種用於放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術,它可看作是生物體外的特殊DNA復制,PCR的最大特點是能將微量的DNA大幅增加。

因此,無論是化石中的古生物、歷史人物的殘骸,還是幾十年前兇殺案中兇手所遺留的毛發、皮膚或血液,只要能分離出壹丁點的DNA,就能用PCR加以放大,進行比對。這也是“微量證據”的威力之所在。

由1983年美國Mullis首先提出設想,1985年由其發明了聚合酶鏈反應,即簡易DNA擴增法,意味著PCR技術的真正誕生。到如今2013年,PCR已發展到第三代技術。1976年,中國科學家錢嘉韻,發現了穩定的Taq DNA聚合酶,為PCR技術發展也做出了基礎性貢獻。

PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶最適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。

基於聚合酶制造的PCR儀實際就是壹個溫控設備,能在變性溫度,復性溫度,延伸溫度之間很好地進行控制。

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