C肽釋放試驗的做法與註意事項與葡萄糖耐量試驗，胰島素釋放試驗相同，它的臨床意義是：
（1）測定C肽，有助於糖尿病的臨床分型，有助於了解患者的胰島功能。
（2）因為C肽不受胰島素抗體幹擾，對接受胰島素治療的患者，可直接測定C肽濃度，以判定患者的胰島β細胞功能。
（3）可鑒別低血糖的原因。若C肽超過正常，可認為是胰島素分泌過多所致，如C肽低於正常，則為其它原因所致。
（4）C肽測定有助於胰島細胞瘤的診斷及判斷胰島素瘤手術效果，胰島素瘤血中C肽水平偏高，若手術後血中C肽水平仍高，說明有殘留的瘤組織，若隨訪中C肽水平不斷上升，揭示腫瘤有復發或轉移的可能。