1998年畢業於解放軍藝術學院舞蹈系，其後接拍廣告，並於2002年接拍電視連續劇《大唐歌飛》中女主人公許合子壹角開始從業演藝事業，正式開啟馬蘇的演藝道路，2003年畢業於北京電影學院表演系。
2003年6月至2003年8月出演電視劇《絲路豪俠》飾演瑪瑙 ；9月至11月出演電視劇《夏日裏的春天》飾演古靈精怪的女主人公李春天；2003年11月至2004年1月出演《愛在有情天》飾演溫婉古典的孫秀冬壹角，超越年齡成功演繹了壹個壓抑叛逆、時時處於矛盾中的少婦形象。
2004年出演電視劇《我的功夫女友》飾演女主人公姚開心；3月至6月出演電視劇 《後海前街》飾演女主人公文新壹角。
2005年出演電視劇 《碧血劍》飾演安小慧；電視劇《大冒險家》飾演尤然；及電影《群英會》飾演青蓮、《東江特遣隊》飾演林亞珍、《天上掉餡餅》裏飾演寶兒。
2006年出演電視劇 《吳越錢王》，飾演甄珠鳳壹角；出演電視劇《武當Ⅱ》，飾演朱婉郡主。同年其主演的電影《但願人長久》 在2月17日在澳大利亞拜倫電影節上，獲得了最佳影片、最佳劇情兩項大獎的殊榮。 8月9日，主演的電視劇《紅磨坊》在上海東方電影頻道首播。
2007年出演電視劇《清風明月佳人》 飾演李師師；出演電視劇《睜開妳的眼睛》，飾演齊小璇。2月10日，參與演出的張紀中執導的電視劇《碧血劍》在齊魯電視臺播出。同年零片酬出演兒童公益慈善電影《緣來是愛》。
2008年出演電視劇 《善良背後》，飾演女主角藍欣，成功跨越20年，挑戰角色從年輕演到滄桑阿媽。 出演電影 《鐵人》 尹力導演作品 ，飾演的心理醫生吳夢夏。 同年，在電視劇《道德底線》中突破以往形象飾演的女主人公陳秀壹角，演技成熟，備受觀眾肯定。
2009年出演電視劇《瑞蓮》，飾演女主人公瑞蓮。 同年，出演電視劇《北風那個吹》，飾演性格極端、愛嫉妒、反復無常的劉青壹角，給觀眾留下深刻印象，並憑借該角色獲得第15屆上海電視節“最具潛力女演員獎”。 此外，其主演的電視劇《奪子戰爭》在全國熱播，馬蘇在其中飾演苦情母親陳秀。 同年，參與錄制中國電視藝術委員會為紀念“飛天獎”30周年特別策劃、制作的電視專題節目《飛天傳奇》。
2010年8月14日其主演由汪俊執導的電視劇《我的美麗人生》在央視壹套熱播，其扮演的“小保姆”王小早深受觀眾喜歡，演技受肯定。 11月2日在電視劇《大西南剿匪記》中首次挑戰“女土匪”形象，再次顛覆性的完成了人物塑造，深受業內外的普遍關註。 同年，憑借在《鐵人》中的出色表現,獲得第19屆金雞百花電影節最佳女配角提名。
2011年主演的電視劇《廠花》播出，其飾演的女主角“廠花”白玉萍，以其美麗的形象和堅強不屈的性格，征服了眾多電視機前的觀眾。 4月23日與王誌文、李幼斌擔綱主演的電視劇《旗袍》上星熱播，這是馬蘇首次出演諜戰劇，劇中扮演的關萍露是壹位遊走於地下黨與特務機關的秘密情報人員。 參演中日建交四十周年的獻禮電影《通往明日之愛》，飾演壹位中方企業的負責人，直接掌管日方方案的生死大權，該影片於10月28日在東京電影節特別展映單元中進行超前展映年。 10月22日，受邀出席第二十四屆東京國際電影節。 年底，馬蘇憑借在《旗袍》中的出色表現，獲得了華鼎獎“革命題材最佳女演員”獎等多個獎項。
2012年1月23日，參與演出的電視劇《春光燦爛之歡樂元帥》在深圳衛視黃金檔播出。4月2日，主演的電視《AA制生活》在湖南衛視黃金檔播出。 4月25日，主演的電視劇《小夫妻時代》在湖南衛視黃金檔播出。 8月16日，主演由趙寶剛導演的電視劇《北京青年》在北京、天津、浙江、東方、安徽五大衛視黃金檔全國首播，馬蘇在劇中飾演聰明細心，堅韌不拔、灑脫果敢的大嫂“權箏，在遭遇被分手的時候，她毅然辭去穩定的工作，跟隨李晨飾演的何東重走青春路。 10月7日，主演的電視劇《大男當婚》在浙江 、安徽 、深圳衛視黃金檔播出，馬蘇在劇中飾演倍具爭議的”物質女“蔡微瀾。 9月14日，主演的古裝武俠劇《新白發魔女傳》在湖南衛視第壹周播劇場首播，馬蘇在劇中挑戰出演“白發魔女”練霓裳壹角，演技精湛純熟，扮相令人驚艷，受到觀眾肯定。 9月8日，憑借在《廠花》中的出色表現，獲得第二十六屆中國電視金鷹獎”觀眾最喜愛的女演員“獎。 9月20日，主演的電視劇《中國騎兵》在江蘇衛視黃金檔播出。 年底，馬蘇憑借在多部熱播劇中的出色表現，獲得華鼎獎“中國偶像勵誌題材最佳女演員獎”、2012國劇盛典”年度電視劇人物“等多個獎項，成為2012年當之無愧的熱播劇女王。
2013年4月24日，2013年福布斯中國名人榜出爐，馬蘇排在福布斯名人榜46位，年收入3040萬元，收入排名為49位。 6月29日，主演的電視劇《烈焰》在河北衛視黃金檔上星播出。7月31日，主演的電視劇《今夜天使降臨》在浙江、深圳、陜西衛視黃金檔聯合首播。 12月3日，主演的電視劇《三十歲，妳好》在江西衛視黃金檔播出。 12月26號，第29屆中國電視劇飛天獎頒獎盛典，在中央電視臺新址演播大廳隆重舉行，馬蘇憑借在電視劇《廠花》和《北京青年》中的出色表現，獲得飛天獎優秀女演員獎稱號，成為首位80後飛天視後 。
2014年5月4日，2014年福布斯中國名人榜出爐，馬蘇排在福布斯名人榜76位，年收入1850萬元，收入排名75位。 7月7日，由馬蘇、沙溢主演的輕喜劇《結婚前規則》在北京舉行發布會， 7月11日衛視首播。 9月7日，客串出演的電視劇《美人制造》在湖南衛視播出。多倫多時間9月7日，《心花路放》導演寧浩帶領馬蘇、周冬雨參加多倫多國際電影節， 經過16日，21日，27日三場點映後， 於9月30日全國公映的電影《心花路放》票房於10月16日破10億，而馬蘇突破形象飾演喝酒不含糊、花錢不吝嗇、告白不扭捏的東北老妹兒成為影片壹大亮點，深受觀眾好評。 10月23日獲得第十屆全國十佳電視制片“十佳電視劇演員”獎。 11月4日憑借在《心花路放》的出色表現獲得第十屆中美電影節“最佳女配角”獎。 12月1日、3日，由馬蘇、李光潔主演的電視劇《團圓飯》分別在上海、北京舉行發布會， 12月6日衛視首播。 12月7日再度憑借在《心花路放》中以顛覆性的演出獲得第二屆倫敦國際華語電影節“最佳女配角”獎。 同年，參與演出新浪娛樂年終特別呈現的2014最美表演短片《夢想要萬壹實現了呢》，演繹2014十大熱門事件之壹的阿裏巴巴上市。
2015年3月4日，在中央電視臺元宵晚會上，表演舞蹈《國色天香》，在其中飾演楊貴妃。 3月28日，馬蘇主演的《天使的城》在浙江衛視、江蘇衛視黃金檔聯合播出。 同時客串的電影《何以笙簫默》於4月30日上映。 5月11日，福布斯中文版推出2015年中國福布斯榜，馬蘇綜合排名84位。 8月1日 ，參與的真人秀《十二道鋒味第二季》在浙江衛視播出。 8月5日，電視劇《秀才遇到兵》在江蘇衛視、北京衛視黃金時間聯合播出。 10月18日，受邀出席第十屆羅馬電影節。 11月30日，特別出演的電視劇《羋月傳》在北京衛視、東方衛視黃金時間聯合播出，馬蘇再次突破自己挑戰出演劇中第壹反派“魏夫人”。
2016年2月15日，主演的電視劇《還是夫妻》在央視壹套黃金檔播出。 2月底，前往2016米蘭秋冬時裝周看秀。 3月初，出席2016巴黎秋冬時裝周。 主演的歷史戰爭影片《大轟炸》預計九月份全國上映，奇幻治愈系電影《28歲未成年》預計暑期上映 。