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在elisa實驗中所需要的壹個重要顯色成分是

在elisa實驗中所需要的壹個重要顯色成分是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2)。

elisa試劑盒酶聯免疫診斷試劑盒的底物A就是顯色劑A(含過氧化氫)為供氫體(DH2),底物B就是顯色劑B(含TMB),用於顯色。另外,常用的底物還有:AP的底物,常用的為對-硝基苯磷酸脂(PNP),其反應物為黃色的對硝基酚,測讀波長為405nm2)GOD的底物,為葡萄糖,供氫體為對硝基藍四氮唑,反應產物為不溶性的藍色沈澱什麽是TMB?

TMB即四甲基聯苯胺(3,3’,5,5’-Tetramethylbenzidine)是壹種脂溶性較強的基團,因此容易進入細胞與細胞器中的HRP反應,且由於這種高度的脂溶性,使其易形成多聚體,在HRP活性部位產生粗大的、深蘭色沈澱物,這使得TMB成為組化實驗中的壹種很好的發色團。同時反應產物的沈澱,使得HRP的活性部位更加暴露,利於酶氧化反應進行。

TMB的反應產物為深藍色,利於光鏡觀察,且反應產物越聚越大,常超出單個細胞器的範圍(而DAB則被限制在其內),故TMB反應的檢測閾較低。

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