1 材料與方法
1.1材料
材料取自山東農業大學教學花卉研究所，於晴天中午，取紫枝玫瑰的當年生枝條的中上部莖段，保存於冰壺中，1h內帶回試驗室。接種時切成約25px長的至少帶有1個腋芽的莖段。
1.2方法
初代培養、繼代培養、生根培養均采用4因素3水平正交L9(34)（見表1），每處理接種30個外植體，重復3次，20d後統計啟動率、褐化率、平均芽長等有關數據。
表1 各階段因素水平列表*
Tab.1 List of fators and level of all factors 水平 level 初代培養 Primary Culture 繼代培養 Multiplication culture 生根培養 Root induciton culture NAA 6-BA 6-BA NAA GA3 NAA IBA 水平1(Level1) 0.05 0.5 0.3 0.02 0.20 0.40 0.3 水平2(Level 2) 0.08 0.8 0.8 0.05 0.40 0.55 1.3 水平3(Level 3) 0.13 1.8 1.8 0.08 0.55 0.70 2.3 *?備註：表中數據的單位均為mg*l-1 are Note: the units of date in the Tob.1 are all mg*1-1
2 結果與分析
2.1 初代培養
按照正交設計試驗方案，進行試驗。從圖1可以看出，C3、C2、C5、C6在促進外植體的啟動方面，效果較好，啟動率均在80%左右；C2、C6處理，外植體平均芽長分別1.0、30px，明顯好於其它幾個處理；C3在抑制褐化方面，效果稍好。綜合各種指標，認為初代培養采用C6、C2為宜，但C6處理中6-BA,NAA濃度均高於C2中的，結合經濟方面，在生產上宜選擇C2處理。
2.2 繼代培養
方差分析表明(表2)，BA，NAA三水平之間的差異不顯著；GA三水平之間的差異顯著，說明不同濃度的GA是影響無菌芽苗增殖的重要因素。
表2 正交試驗方差分析（分化率）
Tab.2Variance Analysis of Orthogonal Experiment 變異來源
VS 平方和
SS 自由度
df 均方
MS F值
F-value 顯著水平
P-value BA 0.00216 2 0.00108 0.32836 0.75281 NAA 0.08413 2 0.04207 12.77288 0.07261 GA 0.23323 2 0.11661 35.40795 0.02747* 誤差 Error 0.00659 2 0.00329 總和 Total 0.32611 為了找出最佳水平組合，我們進行了LSD多重比較分析(表3)。從表中可以看出，9個處理間大多數差異不顯著，總起來看，J9、J3較好。說明這兩個處理的水平組合對無菌芽苗增殖有明顯地促進作用。
表3 多化率的多重比較
Tab.3Multiole Comparisons of the Rate of Differentiation 培養基
Medium 均值
Average value 5%顯著水平
5% Notable level J3 0.96 a J9 0.912 a J4 0.773 ab J7 0.773 ab J5 0.667 abc J2 0.633 abc J6 0.526 bc J1 0.417 c 2.3生根培養
經繼代培養後的芽苗長到2-100px時，無菌條件下從芽苗基部切割芽叢為單個芽苗，轉入生根培養基中誘導生根。對生根率進行方差分析，了解各因素對生根的影響。方差分析結果（表4）表明，NAA、IBA對生根率有顯著影響，對其進行LSD多重比較分析，結果見表5。
表4 正交設計方差分析表
Tab.4The Table of variance Analysis 變異來源
VS 平方和
SS 自由度
df 均方
S2 F值
F-Value 顯著水平
P-value NAA 566.2222 2 283.1111 32.25316 0.03007 IBA 869.5556 2 434.7778 49.53165 0.01979 培養基 280.2222 2 140.1111 15.96203 0.05896 誤差 17.55556 2 8.777778 總和 1733.556 從表中可看出，9個處理間大多差異不顯著，總的看，S6、S3、S5較好。說明這三個試驗小區號的水平組合對生根培養有明顯地促進作用，其中S6極顯著於其它幾個處理。綜合上面分析，無菌芽苗生根培養基的最佳組合為:S6即1/2MS+8g瓊脂+30g蔗糖+0.55mg*l-1NAA+2.3 mg*l-1IBA+2 g*l-1AC。
多重比較分析表
Tab.5The Table of Multiple Comparisons 培養基
（Medium） 均值
（Acerage value） 5%顯著水平
P-value (5%) 1%極顯著水平
P-value(10%) S6 85 a A S3 79 a AB S5 76 a AB S9 74 ab AB S4 72 ab AB S7 69 ab AB S1 56 bc AB S8 48 c AB S2 42 c B 3 結論
紫枝玫瑰初代培養基以MS+8g瓊脂+30g蔗糖+1.8 mg*l-16-BA+0.08mg*l-1NAA+2g*l-1AC較好。增殖培養基以MS+8g瓊脂+30g蔗糖+1.8mg*l-16-BA+0.08mg*l-1NAA+0.4mg*l-1GA3較好。生根培養基以S6即1/2MS+8g瓊脂+30g蔗糖0.55 mg*l-1NAA+2.3 mg*l-1IBA+2 g*l-1AC+較好。