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郁金香碎色病毒的形態特征

病毒顆粒是絲狀的;

沒有信封;通常為纖維狀;圖案明顯:長750-775 nm,寬14 nm。軸槽模糊。基本螺旋模糊。包涵體出現在植物細胞中。植物汁的熱失活點為65-70度(McWhorter,1938)。在百合汁中可以持續4-6天(布賴爾利和史密斯,1944)。最大稀釋度為1/10000,顆粒沈積物為單組分,沈降系數為153S。當從郁金香栽培品種Jack Laan和Divera純化時,在260nm處的比吸收值為1.03-1.13,而當從Texas Flame純化時,其為1.13-1(Derks等人,61

凈化

由於葉提取物中兩種病毒顆粒的聚集,不可能制備純化的病毒。Derks等人(1982)描述了以下過程:在含有1% Na2SO3 (w/v: 2/5)的0.1M三巰基乙酸(pH 9.0)中勻漿郁金香葉(新鮮的、在-20℃冷凍的或凍幹的)。粗紗布過濾後的勻漿在65438±0500g離心65438±00分鐘。將上清液與5%Triton X-100壹起攪拌45分鐘-1h。90,000g離心90分鐘。加入1/8體積的0.1M tris-HCl(pH9.0)重懸沈澱,離心8000g 10min。上清液90,000g離心90分鐘。用0.1M tris-HCl(pH 9.0)重懸沈澱(每100g 2ml),離心8000g 10min。上清液中加入抗宿主蛋白(1ml上清液+0.1ml),可在4℃保存18h。9000g離心10分鐘。上清液90,000g離心90分鐘。重懸沈澱在0.1M tris-HCl(pH 9.0)中,7000g離心10min。上清液含有純化的病毒。純化的上清液非常均勻。顆粒不會聚集或破碎。在50%的甘油中,病毒上清液可以在-20℃下儲存數年而沒有聚集或碎裂的跡象。

基因庫序列NCBI

序列數據(Entrez搜索)序列數據庫登錄密碼:

s 44147 Em(40)_ VI:s 44147 Gb(84)_ VI:s 44147多蛋白前體郁金香破碎病毒,百合,基因組RNA,1556 nt。1/94 1,556bp。

s 60804 Em(40)_ VI:s 60804 Gb(84)_ VI:s 60804外殼蛋白郁金香破碎病毒TBV,基因組RNA,277 nt。1/94 277bp。

s 60808 Em(40)_ VI:s 60808 Gb(84)_ VI:s 60808外殼蛋白倫勃朗郁金香破碎病毒ReTBV,基因組RNA,277 nt。1/94 277bp。

X63630 Gb(84)_vi:TMVCPRNA郁金香花葉病毒外殼蛋白基因。7/94 1.479 BP。

s 60806 Em(40)_ VI:s 60806 Gb(84)_ VI:s 60806外殼蛋白郁金香破頂病毒TTBV,基因組RNA,277 nt。1/94 277bp。

s 60810 Em(40)_ VI:s 60810 Gb(84)_ VI:s 60810外殼蛋白百合斑駁病毒LiMV,基因組RNA,277 nt。1/94 277bp。6個序列。

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