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谷丙轉氨酶活性測定的實驗報告怎麽寫

谷丙轉氨酶活性測定的實驗報告要從以下幾個方面入手:實驗方法原理、實驗材料、儀器、耗材、實驗步驟。具體模板如下:

實驗方法原理

血清谷丙轉氨酶(SGPT)能催化丙氨酸與酮戊二酸生成谷氨酸和丙酮酸,丙酮酸在酸性條件下與2,4-二硝基苯肼可縮合成丙酮酸二硝基苯腙,該腙在堿性條件下呈現出橙紅色,呈色深淺符合比爾定律,在520 nm處有最大吸收。

SGPT 在肝臟中含量最高,由於肝細胞損害,該酶逸出血液,可使 SGPT 含量明顯增高。因此測定血清谷丙轉氨酶的活性可作為肝中毒肝病的重要指標。

實驗材料

丙酮酸、丙酮、α-酮戊二酸、dl-丙氨酸、2,4——二硝基苯肼、氫氧化鈉

儀器、耗材

恒溫水浴鍋、分光光度計、吸量管、試管、試管架

實驗步驟

1、標準曲線的繪制:取幹燥潔凈試管6支,編號。每管加0.5ml 2,4—二硝基苯肼,再保溫20 min,分別向各管加入0.4 mol/L氫氧化鈉溶液5 ml,室溫下靜置10 min後,用蒸餾水調零點。

於520nm處測光密度,以各管光密度減去空白管光密度為縱坐標,丙酮酸微克數為橫坐標作標準曲線。

2、SGPT活力測定:取潔凈幹燥試管4支,即測定管、對照管各2支。各管反應完畢,混勻,室溫下靜置10 min後,再以蒸餾水調零點測定光密度。由標準曲線上查得丙酮酸微克數,根據下式計算SGPT 的活力:SGPT 活力(單位)=(測定管微克數-對照管微克數)/2.5×0.1。

擴展資料:

谷丙轉氨酶活性測定的註意事項

1、在呈色反應中,2,4-二硝基苯肼可與有酮基的化合物作用形成苯腙,底物中α-酮戊二酸可與之發生反應,生成α-酮戊二酸苯腙。故制作標準曲線時,需要加入壹定量的底物以抵消α-酮戊二酸的影響。

2、在測定 SGPT 活力時,應事先將底物、血清在37 ℃水浴中恒溫,然後在血清管中加入底物,準時計時。

3、標準曲線上數值在20~100 U是準確可靠的,超過200 U 時,需將樣品稀釋。

4、丙氨酸應使用 DL-型,不使用 D-型。如使用 L-型,用量減半。

5、溶血標本不宜使用,因血細胞內轉氨酶活力較高,會影響測定結果。

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